PF是過特異性NLRP3/GSDMD信號(hào)通路發(fā)揮的重要作用

2025-07-12 點(diǎn)擊數(shù)：0 分享至:

2024年9月3日，成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院馬驍教授團(tuán)隊(duì)在Phytomedicine上發(fā)表了題為“Paeoniflorin inhibited GSDMD to alleviate ANIT-induced cholestasis via pyroptosis signaling pathway”的文章，揭示芍藥苷（PF）靶向GSDMD通過NLRP3依賴性焦亡途徑和隨后的炎癥介質(zhì)釋放，減輕膽汁淤積。

芍藥苷（Paeoniflorin， PF）是一種從芍藥中提取的生物活性化合物，對(duì)多種肝臟疾病具有顯著的保護(hù)作用。PF不僅促進(jìn)膽汁酸分泌，還能增強(qiáng)膽汁酸的轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝。在這些發(fā)現(xiàn)的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步闡明了PF在調(diào)節(jié)NLRP3炎性體中的作用，特別是減輕抗炎藥誘導(dǎo)的膽汁淤積。本研究旨在探討PF是否通過特異性NLRP3/GSDMD信號(hào)通路發(fā)揮其保肝和降膽作用，并確定其潛在的治療靶點(diǎn)。

研究方法

動(dòng)物與細(xì)胞模型

使用SD大鼠和HepG2細(xì)胞建立ANIT誘導(dǎo)的膽汁淤積模型（CT）。

組織學(xué)檢查

通過蘇木精-伊紅（HE）染色評(píng)估肝臟組織病理學(xué)改變。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)

CT治療中潛在的PF靶點(diǎn)

焦亡水平評(píng)估

采用血清生化分析、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、免疫熒光（IF）、免疫組化（IHC）、Western blotting、透射電子顯微鏡（TEM）和掃描電子顯微鏡（SEM）等方法。

蛋白質(zhì)芯片篩選

使用HuProt? 20K Chip篩選PF的潛在結(jié)合靶點(diǎn)。

結(jié)合位點(diǎn)鑒定

通過分子對(duì)接（MD）、分子動(dòng)力學(xué)模擬（MDS）、細(xì)胞熱移位試驗(yàn)（CETSA）和表面等離子體共振（SPR）等技術(shù)驗(yàn)證PF與靶點(diǎn)的結(jié)合。

（SPR檢測(cè)KD值為12.3 μM。PF具有直接結(jié)合GSDMD蛋白的能力。采用MD和MDS等綜合技術(shù)，確定了PF與GSDMD的特異性結(jié)合方式。此外，CETSA和SPR技術(shù)顯示PF與GSDMD具有高親和力，為PF的直接靶向作用提供了一致的證據(jù)。）

研究結(jié)果

PF改善肝臟損傷

PF給藥可減輕ANIT誘導(dǎo)的肝臟病理變化，提高肝功能指標(biāo)，并改善細(xì)胞存活率。

焦亡通路

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和焦亡抑制劑研究表明，PF可能通過NLRP3依賴的焦亡通路緩解CT。Western blotting、IF和IHC分析進(jìn)一步支持了PF抑制NLRP3依賴焦亡的潛力。

GSDMD作為靶點(diǎn)

通過HuProt? 20K Chip篩選，確定GSDMD為PF的靶點(diǎn)。MD、MDS、CETSA和SPR技術(shù)驗(yàn)證了PF與GSDMD的結(jié)合親和力。

炎癥因子釋放

ELISA和IHC結(jié)果顯示，PF通過抑制GSDMD，減少了下游炎癥因子的釋放。

結(jié)論

PF主要通過靶向GSDMD，抑制ANIT誘導(dǎo)的焦亡及隨后炎癥介質(zhì)的釋放。

spr方法描述

研錦生物可以利用基于靶點(diǎn)或小分子結(jié)構(gòu)的藥物設(shè)計(jì)方法，對(duì)可購(gòu)買化合物、天然產(chǎn)物等數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行虛擬篩選，并獲得潛在活性的化合物列表供進(jìn)一步活性實(shí)驗(yàn)確證。面向制藥企業(yè)和科研院所，可提供一站式的早期藥物研發(fā)服務(wù)，包括虛擬藥物篩選、先導(dǎo)優(yōu)化、靶標(biāo)預(yù)測(cè)、動(dòng)力學(xué)模擬等，涉及小分子化學(xué)藥、生物藥、中藥等多種新藥類型，為您提供優(yōu)質(zhì)的藥物發(fā)現(xiàn)服務(wù)

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